日本丰满少妇xxxx-欧美成人免费一区二区-精品日本一区二区三区免费-黑人强伦姧人妻久久-亚洲成国产人片在线观看

新聞中心

News Center

當前位置:首頁新聞中心電轉化連接物構建抗體文庫

電轉化連接物構建抗體文庫

更新時間:2012-12-27點擊次數:1393

[方法]
1.將電轉化儀設置為200D(電阻)、25rtF(電容)和2.5kV。
2.在冰上復溶電感受態細菌或使用新鮮制備的電感受態細胞。將電轉化杯、杯固定夾、細胞和DNA均放于冰上。
3.將80ng已純化且無鹽的DNA與50g1細菌混合。冰上孵育混合物1分鐘。
4.將混合物轉移至0.2cm間距的電轉化杯中,小心操作切勿在電極間留氣泡。輕拍小杯,使所有液體均沉淀于瓶底。迅速轉移以使小杯處于低溫狀態。
5.將透明杯放入電轉化儀內,確保小杯側面干燥(以免電弧)。啟動脈沖,立即加入1.0ml SOC培養基并混合。時間恒定值應在4.5~5.5毫秒范圍之間。如果時間恒定值小于4.3秒,則重復DNA沉淀。
6.在每次電轉化后的細菌中加入lmlSOC培養基,以250r/min振蕩培養,37℃1小時。
7.合并所有電轉化培養液,系列稀釋后在100mm TYE/amp/glu平板上鋪板確定文庫容量。
8.以200g、4℃10分鐘離心剩余的細菌培養液。將每4次電轉化的沉淀重懸于500u1的體積。以每份125ul等量體積分別鋪于150mmTYE/amp/glu平板上或將500ul鋪于含TYE/amp/glu的Nunclon quare ishes500cm2。將這些平板在30℃下培養過夜。
9.加入10m1含15%甘油(0.2gm濾膜過濾除菌)的TYE/amp/glu培養基;刮取平板上的細菌。在-70℃下儲存抗體文庫。

www.gd-guanyu.com

主站蜘蛛池模板: 强摸秘书人妻大乳BD| 99精品国产丝袜在线拍国语| 天天拍夜夜添久久精品| 手机国产丰满乱子伦免费视频| 成人免费无码h在线观看不卡| 朝鲜女人大白屁股ass| 美女大量吞精在线观看456 | 亚洲欧美在线综合色影视| 国产一精品一av一免费| 国产成人精品日本亚洲专区61 | 久久成人国产精品无码| 乱码视频午夜在线观看| 少妇人妻大乳在线视频不卡| 国产真实高潮太爽了| 亚洲免费国产午夜视频| 国产女厕所盗摄老师厕所嘘嘘| 呦系列视频一区二区三区 | 国产在线精品一区二区高清不卡| 精品久久久噜噜噜久久| 18禁黄网站禁片免费观看国产| 午夜爽爽爽男女免费观看一区二区| 一本一本久久a久久综合精品蜜桃 久久99亚洲网美利坚合众国 | 国产成人亚洲精品无码av大片 | 成年网站未满十八禁视频天堂| 亚洲人成网站在线播放无码| 欧美在线看片a免费观看| 国产成人av综合色| 动漫?奶头张开腿被?男同| 亚洲男女一区二区三区| 久久精品中文字幕无码绿巨人| 午夜性无码专区| 日本公妇乱偷中文字幕| 18禁勿入午夜网站入口 | 久久18禁高潮出水呻吟娇喘| 黑人大荫蒂老太大| 亚洲欧美日韩v在线观看不卡| 精品国产一区二区三区四区精华液| 精品国产高清自在线一区二区| 无码欧美毛片一区二区三 | 亚洲人成毛片在线播放| xxxxx欧美|